所有作者：张春丽 张耀洲 郑青亮 王丹
作者单位：浙江理工大学生命科学学院
论文摘要：从本实验室构建的家蚕蛹cDNA 文库中，筛选获得一个编码家蚕类孕酮膜受体元件２蛋白的基因序列，基因登陆号为：DQ３１１３９０。多序列比对分析该序列编码蛋白发现其可能是细胞内质膜上孕酮受体的一个组分，在调节孕酮参与的细胞内功能方面有重要的作用。为了研究该蛋白在家蚕体内的功能，我们在大肠杆菌Rosetta(DE３)中表 达、纯化了带有His 标签的PGRMC２融合蛋白，并制备了多克隆抗体。通过Western blotting发现PGRMC２蛋白在家蚕五龄幼虫的头、丝腺、生殖腺、脂肪体等组织中均有表达，其中头部、精巢、卵巢中表达量较高，在家蚕发育各时期中，我们发现随着家蚕的发育PGRMC２的表达量也在增加，其中蛾期最高，进一步提取了五龄家蚕各组织及家蚕各发育时期的总RNA，通过荧光定量PCR法，我们发现PGRMC２转录水平在蛾期最高，在卵期很低，并在五龄幼虫中生殖腺最高，中肠最低。表明该蛋白在家蚕的发育和生殖系统中发挥重要作用。
关键词： 家蚕 孕酮膜受体元件2 原核融合蛋白表达与纯化 Western-blotting RT-PCR
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