耐热乳糖酶基因bgaB的克隆及其在毕赤酵母中的表达

论文发布时间：[2009-10-14] 范文大全编辑：Voive.net

所有作者：王霁昀夏雨陈海琴田丰伟赵建新陈卫张灏

作者单位：江南大学食品学院

论文摘要：耐热β-半乳糖苷酶以其良好的热稳定性和较高温度下的水解特性使之具有常温乳糖酶无法比拟的优越性。本文主要研究来源于嗜热脂肪芽孢杆菌的耐热β-半乳糖苷酶基因在毕赤酵母真核系统中的表达。将耐热β-半乳糖苷酶bgaB基因克隆到大肠杆菌-毕赤酵母穿梭质粒pPIC９k中，经测序证实插入的外源基因读码框正确后，电转化到毕赤酵母GS１１５中构建重组菌株GS１１５-pPIC９k-bgaB，经MD和遗传霉素平板筛选得到３株阳性转化菌株，甲醇诱导后，可表达相对分子质量约为７０ kDa的蛋白，与预期值一致。所表达的半乳糖苷酶活力最高为０。２６ U/mL。

关键词：耐热β-半乳糖苷酶毕赤酵母重组表达

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