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人端粒酶逆转录基因siRNA表达质粒的构建和鉴定

论文发布时间:[2010-02-05]    范文大全    编辑:Voive.net

所有作者:刘东雷 王建军 郑庆丰 韩颖超 刘全 严会志

作者单位:华中科技大学同济医学院附属协和医院胸外科

论文摘要:目的:构建含人端粒酶逆转录酶(Human telomerase reverse transcriptase,hTERT)基因的siRNA表达载体,为以端粒酶为靶点的基因治疗肺癌研究奠定基础。方法:化学合成能编码hTERT基因的短发夹RNA(shRNA)序列的寡核苷酸,退火处理克隆到pGenesil-1U6 shRNA表达载体相的U6RNA聚合酶Ⅲ(PolⅢ)启动子的下游,构建pGenesil-hTERT重组质粒。结果:经酶切电泳及测序分析证实,目的序列成功插入到预计位点。结论:已成功构建pGenesil-hTERT载体,为进一步对其端粒酶活性的抑制作用打下基础。

关键词: RNA干扰 短发夹RNA 人端粒酶转录酶

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