所有作者：孙慧超 田杰 朱静 吕铁伟 陈国珍 李娅莎
作者单位：重庆医科大学附属儿童医院
论文摘要：目的 构建并筛选小鼠p３００特异性siRNA载体，为进一步研究p３００对胚胎心脏发育的时空调控，及p３００介导的组蛋白乙酰化失衡对心脏发育的影响奠定基础。方法 针对小鼠p３００基因的保守序列区域设计并构建三个重组质粒p３００ RNAi１，p３００ RNAi２和p３００ RNAi３。利用阳离子脂质体将其分别转染体外培养的小鼠胚胎干细胞(C３H/１０T１/２细胞系)，分别利用RT-PCR和免疫荧光从mRNA和蛋白水平检测p３００表达，判断抑制效率。结果 分别转染了p３００ RNAi１和p３００ RNAi３的细胞内p３００比正常细胞内表达水平减弱（P０。０５）。 结论 p３００特异性siRNA 质粒载体构建成功，p３００ RNAi１和p３００ RNAi３具有确切阻断p３００表达的作用，为进一步研究p３００在胚胎心脏发育过程中的作用奠定了实验基础。
关键词： RNA干扰 p300 心脏 表观遗传学 组蛋白乙
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