BmCycH蛋白的表达分析与细胞定位

论文发布时间：[2009-12-03] 范文大全编辑：Voive.net

所有作者：江艳童富淡张耀洲

作者单位：浙江理工大学生物化学研究所

论文摘要：筛选本实验室的家蚕蛹 cDNA 文库，得到一条编码cyclin H蛋白的基因序列(GenBank NO。AV４０６０４７)，将其命名为BmCycH (Bombyx mori cyclin H)。该基因序列长为７５３ bp，编码２５０个氨基酸，该蛋白含有一个Ccl １保守结构域。在E。coli BL２１(DE３)中表达并纯化了带有 His 标签的BmCycH蛋白。以纯化所得蛋白为抗原免疫雄性新西兰兔，制备了该重组蛋白的多克隆抗体。实时荧光定量 PCR的结果表明，家蚕BmCycH的mRNA在家蚕的各个发育时期及不同组织中广泛存在，尤其在蛾、蛹、幼虫、卵表达量依次降低，这些研究表明BmCycH蛋白在家蚕发育分化过程中可能起到一定作用；为进一步获得其功能信息。Western blotting 检测证明，BmCycH在所检测家蚕的各发育时期及各组织中，各个时期及组织均有不同程度的表达，其中蛾和蛹期表达量较高。用获得的多克隆抗体进行亚细胞定位，在家蚕BmN细胞中信号显示该蛋白基本定位于的细胞核中。

关键词：家蚕 cyclin H 表达分析实时荧光定量PCR 亚细胞定位

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