家蚕Prohibitin基因的表达和性质分析

论文发布时间：[2009-11-24] 范文大全编辑：Voive.net

所有作者：张学芳庄文华吕正兵张耀洲

作者单位：浙江理工大学生命科学学院生物化学研究所

论文摘要：Prohibitin(PHB)是一种进化保守分布广泛的多功能蛋白。然而它具体的功能机制目前还不清楚。为了更好的了解PHB蛋白的性质，我们从家蚕蛹cDNA文库中克隆了prohibitin基因的cDNA序列，该基因的开放阅读框（ORF）全长８２５ bp，编码２７４个氨基酸残基，命名为家蚕Prohibitin蛋白(BmPHB)。我们将其ORF克隆到原核表达载体pET-２８a中，经IPTG诱导在大肠杆菌Rosetta中成功表达，经镍柱和FPLC反相柱层析纯化后，质谱分析得到该融合蛋白的分子量为３３５３１。０ Da。以纯化蛋白免疫雄性新西兰兔，制备了该重组蛋白的多克隆抗体，ELISA检测该抗血清的效价可达１：１２８００。提取家蚕各时期和五龄幼虫各组织蛋白，Western blot实验结果表明，BmPHB蛋白在家蚕卵、幼虫、蛹期都有表达，在五龄幼虫的生殖腺、马氏管、气管、脂肪体、肠道、头等组织中都有表达，且表达量依次降低，而在丝腺、表皮以及蛾中没有检测到该蛋白的存在。亚细胞定位结果表明，Bm５细胞中BmPHB在细胞核和细胞质中均有分布且主要存在细胞质中。

关键词：家蚕 Prohibitin 表达分析亚细胞定位

免费下载《家蚕Prohibitin基因的表达和性质分析》PDF全文（已停止下载）
　　本站“论文下载”文章收集整理于“中国科技论文在线”，由于各种原因，本站已暂停论文下载！请前往“中国科技论文在线http://www.paper.edu.cn/”免费下载！

〖返回生物学论文列表〗

下一篇：凋亡素特异诱导肿瘤细胞凋亡的蛋白质组学研究