HCCS1转运功能区的研究

论文发布时间：[2010-04-08] 范文大全编辑：Voive.net

所有作者：周华刘鸿赵新泰周秀梅

作者单位：浙江理工大学生命科学学院

论文摘要：肝癌抑制基因-１(HCCS１)是一种潜在的肝癌抑制基因，在细胞内发挥蛋白分拣运输的作用，其抑癌作用有可能与蛋白转运的功能有一定的关系。本文目的是寻找HCCS１序列中与转运相关功能的序列区域。首先通过亚克隆技术，构建以pEGFP-C２为载体，对不同长度HCCS１-cDNA片段进行亚克隆，将构建的亚克隆转染到宫颈癌HeLa细胞，通过免疫荧光显微镜观察不同长度HCCS１蛋白在细胞内的分布，及其与６-磷酸甘露糖受体(M６PR)的共定位。经过PCR及亚克隆后，目的片段成功连入载体质粒，构建了以pEGFP-C２为载体的含有四个不同长度HCCS１片段的亚克隆。分别是： pEGFP-C２-N１８３６，pEGFP-C２-N１５７２，pEGFP-C２-１７０７和pEGFP-C２-１５０６，其中pEGFP-C２-N１８３６和pEGFP-C２-N１５７２编码的不同长度HCCS１蛋白均呈颗粒状、极性分布于核周的胞质内，且与M６PR有共定位；而pEGFP-C２-１７０７片段编码的HCCS１蛋白虽然也呈颗粒状分布于核周，但极性分布消失，且与M６PR共定位消失；pEGFP-C２-１５０６与pEGFP-C２-１７０７结果相似。结果确定了HCCS１-cDNA的５’端的１２９ bp序列为与HCCS１的极性相关的区域。

关键词： HCCS1 功能序列免疫荧光转运

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