人HSP70表达载体的构建及在无细胞中的表达

论文发布时间：[2010-04-07] 范文大全编辑：Voive.net

所有作者：吴彩霞何为岳凤珍刘琼明赵信利许丹科

作者单位：兰州大学基础医学院,兰州（730000）

论文摘要：目的：构建人类HSP７０基因的pCMV- HSP７０-myc载体，利用体外无细胞表达技术实现HSP７０在体外的快速表达。方法：PCR扩增HSP７０基因的读码框，酶切目的片段后构建到pCMV-myc载体上形成融合表达质粒，经过测序鉴定成功后，利用兔网织红细胞体外表达体系进行蛋白的体外无细胞表达，表达产物采用Western blot进行验证。结果：成功构建了pCMV- HSP７０-myc载体，并用Western blot方法验证了HSP７０的体外无细胞表达产物分子量与理论值大小相符，成功的实现了HSP７０的体外快速表达。结论：pCMV- HSP７０-myc融合表达质粒的成功构建及其在体外无细胞体系中的有效快速表达，为进一步探讨HSP７０的生物学功能以及在抗肿瘤中发挥的作用奠定了基础，也为一些难以表达的跨膜蛋白的研究提供了新的平台。

关键词： HSP70 融合表达载体无细胞表达

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