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人PINK1抗血清的制备及其免疫活性物质在大鼠脑组织中的表达

论文发布时间:[2010-03-03]    范文大全    编辑:Voive.net

所有作者:李继胜 李尧华 李昕 于顺 王年强 孙晓红 杨慧

作者单位:首都医科大学 北京神经科学研究所

论文摘要:目的 制备帕金森病相关蛋白PINK1抗血清并检测其在大鼠脑组织中的表达特征。 方法 制备人PINK1基因重组蛋白,免疫新西兰大耳白兔获得抗PINK1抗血清;通过盐析法初步纯化、Western blot法鉴定抗血清的敏感性和特异性、免疫组化法检测PINK1在大鼠脑中的分布。 结果 人PINK1基因重组蛋白以包涵体形式在大肠杆菌中高效表达;纯化蛋白制备兔抗血清经盐析纯化后,兔抗人PINK1抗血清特异性识别人PINK1基因重组蛋白及大鼠脑匀浆中40kDa和66kDa的蛋白质,与预期结果一致;免疫组化染色显示PINK1广泛分布在嗅球、皮层、海马、纹状体、小脑、黑质和红核。 结论 制备了一种兔抗人PINK1多克隆抗血清;PINK1广泛分布于大鼠中枢神经系统;为以后深入研究PINK1表达的组织分布、细胞内定位及其生物学功能提供了有效地实验工具。

关键词: PINK1 抗血清 大鼠 重组蛋白

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