与内肥素结合短肽的筛选

论文发布时间：[2010-02-03] 范文大全编辑：Voive.net

所有作者：刘新宇李晶梁东春于德民

作者单位：天津医科大学代谢病医院

论文摘要：目的：筛选与内肥素结合的短肽序列，探讨内肥素在胰岛素受体上的可能结合部位。材料与方法：为研究与内肥素结合的多肽序列，将纯化后的内肥素包被于培养平皿上，通过噬菌体展示技术对噬菌体随机七肽文库进行三轮淘选后，表面展示有与内肥素能发生特异性结合的多肽序列的噬菌体被富集。富集后的噬菌体最后被洗脱下来，随机对其中２４个阳性克隆进行DNA序列分析，根据DNA序列分析的结果，推断出与内肥素特异性结合的多肽模序。结果：通过ELISA证实，所有经淘选获得的序列均能与内肥素发生特异性结合。根据DNA测序结果，发现在这些序列中，AAKTPTE、ATTVPAS以及MSLQQEH短肽出现的频率最高，分别有８个、４个和４个克隆。结论：成功构建了内肥素的高效原核表达系统，高效表达的重组蛋白具有生物活性。通过对淘选所获得的短肽序列测序结果进行分析，可以发现AA(X)TPT(X)这个序列的出现的频率很高，这个序列很可能就是与内肥素相结合的多肽的最基本的模序。

关键词：内肥素脂肪因子噬菌体展示模序

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