所有作者：吴焜 王琼 郝丽 程璐 陈晓光
作者单位：南方医科大学公共卫生与热带医学学院病原生物学系
论文摘要：目的 建立弓形虫RH株体外培养及速殖子与缓殖子相互转化体系。方法 纯化弓形虫RH株速殖子，接种于NIH３T３细胞单层，进行体外培养。接种４h后，换用pH８。１的碱性培养基进行速殖子向缓殖子的诱导转化培养，RT-PCR检测缓殖子蛋白１(BAG１)基因的表达。将诱导的缓殖子重新用pH７。２的培养基在常规环境下培养，诱导缓殖子向速殖子转化。为探索温度对速殖子向缓殖子转化的影响，将接种RH株速殖子的NIH３T３细胞分别放在３７℃、３９℃、４１℃、４３℃中诱导转化培养，RT-RCR检测BAG１基因的表达。结果 弓形虫RH株能在NIH３T３细胞单层中生长增殖，更换高pH值碱性培养环境后，能诱导弓形虫速殖子转化为缓殖子，RT-PCR检测出缓殖子期特异蛋白BAG１基因的表达，并且随着诱导时间的延长，BAG１基因mRNA的转录水平逐渐提高，表明有更多的速殖子转化为缓殖子。恢复pH７。２的常规培养条件，碱性诱导的缓殖子能转化为速殖子。在４１℃诱导条件下，能诱导RH株速殖子转化为缓殖子。结论 成功构建弓形虫体外培养及速殖子与缓殖子相互转化体系，为转化机制的研究奠定基础。
关键词： 弓形虫 体外培养 速殖子 缓殖子 转化
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