黄瓜花叶病毒2b基因瞬时表达载体的构建及鉴定

论文发布时间：[2010-01-28] 范文大全编辑：Voive.net

所有作者：李喜英赵志敬杜志游陈集双

作者单位：浙江理工大学生物工程研究所

论文摘要：黄瓜花叶病毒（CMV）２b蛋白由CMV的亚基因组RNA４A表达产生，是最早被证实为抑制转录后基因沉默的抑制子之一。从三种不同CMV的pFRNA２中克隆出２b基因片段，将其PCR产物与pUC１８载体连接，经PCR鉴定，测序比对正确后，用SacI/BamHI双酶切得到２b基因片段，亚克隆至经相同双酶切的pBI１２１载体。经２b基因片段的PCR鉴定，筛选出阳性重组体，即为三种pBI１２１-２b瞬时表达载体。将载体电转化到农杆菌EHA１０５中，通过与携带pBI１２１-GFP的菌液共浸润分析各２b蛋白的生物学活性。为研究２b基因的致病性与抑制转录后基因沉默的内在关系提供必要的生物学材料。

关键词：黄瓜花叶病毒 2b蛋白瞬时表达载体基因沉默

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