所有作者：景彩霞 陈建平 刘明杰 徐佳楠
作者单位：四川大学华西基础医学与法医学院寄生虫学教研室
论文摘要：目的 构建了引入CpG基序的lvgA基因的真核表达质粒pclvgA/CpG，并在NIH３T３细胞中表达。方法 采用PCR方法将特定CpG基序作为核酸佐剂构建于嗜肺军团菌lvgA基因侧翼，定向克隆入真核表达载体pcDNA３。１/myc-his(+)，构建重组质粒pclvgA/CpG，体外阳离子脂质体转染法转染NIH３T３细胞。结果 通过测序证实真核表达质粒pclvgA/CpG中lvgA/CpG克隆片段长为６５７bp，推测lvgA基因编码蛋白大小约为２７。７ Ku，lvgA基因及两侧翼原设计CpG基序完整扩出，测序序列与设计序列完全符合。用免疫荧光检测重组质粒在NIH３T３细胞中瞬时表达。结论 本实验成功构建了嗜肺军团菌pclvgA/CpG真核表达质粒，并在NIH３T３细胞检测到其瞬时表达信号。
关键词： 嗜肺军团菌 CpG基序 lvgA 表达 NIH3T3细胞
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