杂交鹅掌楸体胚发生中胚性细胞总RNA提取

论文发布时间：[2010-01-26] 范文大全编辑：Voive.net

所有作者：吴淳陈金慧李婷婷施季森

作者单位：南京林业大学林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室

论文摘要：本实验通过比较改良SDS法、Trizol法和设计的改良CTAB法对杂交鹅掌楸体胚发生过程总RNA的提取结果，进一步通过对设计的CTAB法优化，即重点研究了最佳试材的用量、无水乙醇和异丙醇沉淀RNA效果的比较、LiCl去除多糖及DNA的效果、CHCl３提取次数的效果以及LiCl和无水乙醇沉淀RNA先后顺序不同对RNA的影响等方面。确定了杂交鹅掌楸体胚发生过程总RNA提取最佳体系并利用该体系提取了杂交鹅掌楸体胚发生愈伤组织与体细胞胚的总RNA。并建立了杂交鹅掌楸体胚发生过程反转录合成cDAN第一链体系。合成出的cDNA片段大小在１００-１５００ bp之间，可以满足实验要求，以此第一链成功进行了RT-PCR，并在杂交鹅掌楸体胚中检测到有WUS基因表达。

关键词：杂交鹅掌楸体细胞胚胎发生 RNA提取反转录 RT-PCR检测

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