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血浆microRNA提取技术优化

论文发布时间:[2009-11-05]    范文大全    编辑:Voive.net

所有作者:赵德尧 杜权 郭江峰 丁先锋

作者单位:浙江理工大学,生命科学学院

论文摘要:MicroRNAs (miRNAs) 是一类20-23个碱基长度的单链RNA分子,主要在基因表达的转录后调控过程中发挥作用,对生物体的个体发育具有重要的生理意义。虽然大量的研究表明miRNA的表达变化与细胞或生物个体的生理或病理过程密切,但miRNA的分离纯化技术,尤其是血浆中miRNA的分离纯化远未得到完善。针对这一问题,本研究首先对基于Trizol的血浆miRNA分离过程进行优化,在提取前利用包括超声、加热等不同方法对血浆进行预处理。研究表明,加热或SDS预处理能够有效地提高血浆miRNA的提取效率,将荧光定量PCR的检测值降低了5-10个循环。综上所述,本研究建立了一个优化的血浆miRNA提取方法,该技术不仅能够用于miRNA的表达谱研究,还能应用于疾病相关血浆标志物的鉴定,具有巨大的应用价值。

关键词: 血浆microRNA 提取 技术优化

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